气相色谱-质谱法测定食用油中3-氯丙醇酯

２０１６年１１月　中国粮油学报　Ｊｏｕｍａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｃｅｒｅａｌｓ　ａｎｄ　Ｏｉｌｓ　Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　Ｖｏ１．３１，Ｎｏ．１１　ＮＯＶ．２０１６　第３ｌ卷第１　１期　气相色谱一质谱法测定食用油中３一氯丙醇酯　苗雨田　杨悠悠　王　浩　刘　佟　杨永坛　（中粮营养健康研究院北京市营养健康与食品安全重点实验室，北京摘要１０２２０９）　采用碱水解方式，基于苯基硼酸（ＰＢＡ）衍生化方法并结合气相色谱一质谱（ＧＣ—ＭＳ）联用仪　测定了食用油中３一氯丙醇（３一ＭＣＰＤ）酯的含量。经试验可知，水解时间是碱水解样品前处理方法的关键　因素，经优化，大豆油等不同品类的食用油的最佳水解时间为１～６　ｍｉｎ。另外，以大豆油为基质，考察了基于　碱水解方式的分离分析方法的回收率、重复性以及检出限。其中，在１５０～１　５００　ｇ／ｋｇ范围内进行３水平加　标回收试验，回收率为９４％一１０５％、ＲＳＤ为３．７％一１０．８％、检出限为１５　ｇ／　，定量限为５０　ｇ／　。本方法　能够满足日常样品中３一氯丙醇（３一ＭＣＰＤ）酯的检测。　关键词３一氯丙醇（３一ＭＣＰＤ）酯食用油碱水解水解时间　气相色谱一质谱　中图分类号：ＴＱ６４６．４　文献标识码：Ａ　文章编号：１００３—０１７４（２０１６）ｌｌ一０１３５—０５　３一氯丙醇（３一ＭＣＰＤ）酯是由甘油酯中１号或　ＨＦＢＩ可与许多氯丙醇作用，在羟基上引入七氟丁酰　基，ＨＦＢＩ法衍生前需要确保溶液经过充分的脱水，　此外还要采用硅藻土基质固相分散萃取法净化，操　作复杂、繁琐，并且ＨＦＢＩ试剂价格很高¨　；ＰＢＡ只能　与二醇类发生专一性化学反应，可直接在水溶液中与　３一ＭＣＰＤ反应　，所需前处理步骤较少，成本较低，　在３一ＭＣＰＤ酯检测中较为常用。目前间接法测定　３一ＭＣＰＤ酯的检出限为２７一ｌ　０００　ｇ／　。　本研究采用间接测定方式，利用碱水解对样品　者３号位的羟基被氯原子取代而形成的一氯取代　物，无色，具有愉快性香味。易溶于乙醇，水，乙醚，　丙酮…。１９８０年Ｄａｖｉｄｅｋ等　在酸水解植物蛋白　（ＨＶＰ）中发现３一氯丙醇（３一ＭＣＰＤ）酯，此后陆续　有研究者在各类热加工食品中发现不同水平的３一　ＭＣＰＤ酯　－６　Ｊ。３一ＭＣＰＤ酯主要形成于食品的加工　过程中，尤其是热加工过程，如油脂的精炼、氢化、脱　臭等　。３一ＭＣＰＤ酯目前引起人们的广泛关注主要　是由于３一ＭＣＰＤ酯被人体摄人后，会被脂肪酸酶水　解成游离的３一ＭＣＰＤ，３一ＭＣＰＤ具有潜在的致癌　性，并且能抑制雄性激素的分泌，使精子数减少，精　子活性降低，生殖能力减弱，甚至不育　Ｊ。　３一ＭＣＰＤ酯测定方法的研究已经成为食品安全　检测的热点之一　，目前对油脂中３一ＭＣＰＤ的测定　主要有间接测定和直接测定的方法，间接测定的原　理是将３一ＭＣＰＤ酯水解形成游离的３一ＭＣＰＤ，再将　进行样品前处理，优化了不同食用油的水解时间；使　用ＰＢＡ作为衍生化试剂，评价了衍生化时间对测定　结果的影响；最后，使用ＧＣ—ＭＳ进行了目标化合物　的测定。　１　材料与方法　１．１原料与试剂　３一ＭＣＰＤ进行衍生，使用ＧＣ—ＭＳ进行测定，而直接　测定是将样品净化后经液相色谱分离再使用质谱测　定¨　。直接分析的方法比较难获得所需要的标准品　且费用较高。问接法经济，所需标准品种类少，且灵　大豆油、花生油、菜籽油等９种食用油：市售；　３一ＭＣＰＤ酯标准品（纯度９８％、氘代同位素３一　ＭＣＰＤ—ｄ５酉旨（３一ＭＣＰＤ一１，２一ｄｉｌａｕｒａｔｅ—ｄｓ）标准　品（纯度９８％）：加拿大Ｔｏｒｏｎｔｏ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ　敏度较高。间接法测定过程中，衍生化试剂有丙酮、　全氟酰基咪唑（ＨＦＢＩ）和苯基硼酸（ＰＢＡ）等　。丙　公司；甲基叔丁基醚（ＭＴＢＥ，色谱纯）、苯基硼酸　（ＰＢＡ，分析纯）：德国Ｓｉｇｍａ—Ａｌｄｒｉｃｈ公司。　１．２仪器与设备　酮在衍生时，需要利用甲苯一４一磺酸进行催化　；　基金项目：中粮集团应用基础项目（２０１３一Ｃ２一ＦＯ０７）　收稿日期：２０１５—０３—２４　作者简介：苗雨田，女，１９８８年出生，硕士，食品质量与安全　通讯作者：杨永坛，男，１９７１年出生，研究员，食品质量与安全　安捷伦ＧＣ　７８９０Ｂ一５９７７ＭＳ气相色谱一质谱联　用仪、ＨＰ一５ＭＳ色谱柱（３０　ｍ×０．２５　ｍｍ　ｘ　０．２５　ｘＩｍ）：安捷伦科技有限公司；１－ｒＬ—ＤＣ　ＩＩ氮吹仪：北　京同泰联科技发展有限公司。　１３６　中国粮油学报　２０１６年第１１期　１．３试验方法　１．３．１碱水解　分别称取（１００－４－５）ｍｇ大豆油等９种食用油样　品，加入氘代同位素内标３一ＭＣＰＤ～ｄ５酯标准品溶　液和１００　ＩＬＬ甲基叔丁基醚（ＭＴＢＥ），漩涡使其充分　溶解并混匀。向其中加入２００　２５　ｇ／Ｌ　ＮａＯＨ甲醇　溶液（２５　ｇ　ＮａＯＨ溶解到１　Ｌ甲醇中，现用现配），漩　涡震荡０．５、１、１．５、２、２．５、３、５、７、１０　ｍｉｎ后立即加入　６００　ＩＬＬ　ＮａＢｒ—Ｈ２ｓＯ４混合溶液（３．５　ｍＬ　２５％Ｈ２ＳＯ４　溶解在１００　ｍＬ　６００　ｇ／Ｌ的ＮａＢｒ溶液），涡旋充分混　匀。其后加入６００　Ｌ正己烷，充分涡旋后静置至少　５　ｍｉｎ，待溶液分层后，弃去上层正己烷溶液，重复萃　取２次。最后加入６００　Ｌ乙醚一乙酸乙酯混合溶液　（３：２），充分涡旋后静置，将上层溶液转移至１０　ｍＬ　装有少量无水ＭｇＳＯ　玻璃试管中，重复萃取３次。　合并萃取液待用。　１．３．２衍生化　向碱水解萃取液中加入１００　ｔｘＬ饱和苯基硼酸　（ＰＢＡ）溶液（溶剂为乙醚），涡旋混匀，反应时间为　１—１２　ｍｉｎ。　１．３．３纯化　将衍生液用氮气缓慢吹干，用１　ｍＬ正己烷复　溶，涡旋１　ｍｉｎ，静置１　ｍｉｎ。将上清液过膜转移至　２　ｍＬ／Ｊ＇，瓶中，ＧＣ—ＭＳ分析。　１．３．４　ＧＣ—ＭＳ分析　色谱条件：进样口温度：２８０　ｏＣ；程序升温条件：初　始温度８５℃，保持１２　ｍｉｎ，以２０￣Ｃ／ｍｉｎ升至１６５℃，　保持１０　ｍｉｎ，然后再以２０￣Ｃ／ｍｉｎ升至３００℃，保持８　ａｒｉｎ；载气：高纯氦气，流速为１　ｍＬ／ｍｉｎ；进样方式：脉　冲不分流；进样体积：１　Ｌ。　质谱条件：电子轰击离子源（ＥＩ），离子源温度　２３０　ｏＣ；四级杆温度１５０℃；溶剂延迟６　ｍｉｎ；扫描方　式：选择离子监测（ＳＩＭ）模式。　２　结果与讨论　２．１　３一ＭＣＰＤ和３一ＭＣＰＤ—ｄ５衍生物定性离子与　定量离子的确定　样品中的３一ＭＣＰＤ酯在水解后会生成游离的　３一ＭＣＰＤ，经过ＰＢＡ衍生后形成相应的衍生物。　ｍ／ｚ＝１９６，１９８分别为３一ＭＣＰＤ衍生物氯３５和氯３７　的分子离子峰，ｍ／ｚ＝２０１，２０３分别是３一ＭＣＰＤ—ｄ　衍生物氯３５和氯３７的分子离子峰。ｍ／ｚ＝１４７，１５０　分别是３一ＭＣＰＤ衍生物和３一ＭＣＰＤ—ｄ５衍生物分　子离子峰失去一ＣＨ　Ｃ１和一ＣＤ　Ｃ１后形成的基　峰　。因此，选用ｍ／ｚ＝１４７和ｍ／ｚ＝１５０分别作为　３一ＭＣＰＤ衍生物和３一ＭＣＰＤ—ｄ　衍生物的定量离　子，具有干扰小，灵敏度高等优点。定性离子则分别　为：ｍ／ｚ＝９１、１４７、１９６、１９８和ｍ／ｚ　１４９、１５０、２０１、２０３。　另外，如图１所示，采用ＳＩＭ模式时，３一ＭＣＰＤ衍生　物和３一ＭＣＰＤ—ｄ　衍生物的分离情况较好，且互不　干扰，满足高灵敏度高准确度的要求。　Ｘ　１０　ｄ５～３一ＭＣＰＤ　＼１￣３－ＭＣＰＤ　ｌ６．８５　１６．９５　１７．０５　ｌ７．１５　ｌ７．２５　ｔ／ｍｉｎ　图１　３一ＭＣＰＤ和３一ＭＣＰＤ—ｄ５选择离子图　２．２碱水解样品前处理条件优化　２．２．１水解时间　水解时间过短，可能会造成水解反应不彻底，不　能得到全部的游离３一ＭＣＰＤ，若水解时间过长，３一　ＭＣＰＤ酯已经被完全水解，在强碱性条件下，３一　ＭＣＰＤ会进一步发生反应，影响测定结果的准确度。　因此，衍生化时间的优化至关重要。　图２结果显示，不同食用油最佳水解时间不相　同。以棕榈油为例，当水解时间为２　ｍｉｎ时，响应值　为最大响应值的７８．６％。当水解时间为２．５　ｍｉｎ时，　响应值达到最大，相应值为１２　４０２。水解时间延长　后，响应值逐渐降低，当水解时间为１０　ｒａｉｎ时，响应　值仅为最大响应值的４１．９％。因此在０．５～２．５　ｍｉｎ，３一ＭＣＰＤ酯处于水解阶段，而在２．５～１０　ｍｉｎ是　３一ＭＣＰＤ的消除阶段。因此水解时间选择为２．５　ｍｉｎ。由图２可知，大豆油的最佳水解时间为１　ｍｉｎ。　花生油在水解时间为１．５　ｍｉｎ时，响应值达到最大。　芝麻油和橄榄油的最佳水解时间分别为２．５　ｍｉｎ和　１．５　ｍｉｎ，而玉米油、葵花籽油和葡萄籽油的最佳水解　时间都为２　ｍｉｎ。本研究中菜籽油在水解时间为２．５　ｍｉｎ时，响应值达到最大，而傅武胜等¨　对菜籽油的　水解时间进行优化，结果为１　ｍｉｎ，与本试验结果的　２．５　ｍｉｎ不相同，这是由于ＮａＯＨ甲醇溶液的用量或　ＮａＯＨ浓度不同造成。　第３ｌ卷第１１期　苗雨田等气相色谱一质谱法测定食用油中３一氯丙醇酯　１３７　嚏　髫　霉　刊　耀　盆　Ｕ　皇　图２水解时间对９种食用油３一ＭＣＰＤ衍生物响应值的影响　２．２．２衍生化时间　３一ＭＣＰＤ是含有２个醇羟基，极性较大，容易造　成衬管内的吸附。另外，分离时会造成色谱峰的拖　尾。因此，测定时需要先将３一ＭＣＰＤ衍生化，本研　究采用ＰＢＡ为衍生化试剂，可与３一氯丙醇反应为　极性较小的苯基硼酸３一氯丙二醇酯。　以棕榈油为研究对象，分别衍生１～１２　ｍｉｎ，重复　试验３次（图３）。结果显示，３一ＭＣＰＤ衍生物的响　应与衍生时间并无线性关系，随着衍生时间的变化，　衍生物响应值无明显变化，因此本试验衍生时间选　用１　ｍｉｎ。　×　埴　髫　盆　Ｕ　皇　图３　衍生时间对３一ＭＣＰＤ酯衍生物响应的影响　２．３方法学验证　２．３．１　回归方程、检出限和定量限　以内标３一ＭＣＰＤ—ｄ　衍生物和３一ＭＣＰＤ衍生　物面积比值ｙ和折算后样品中３一ＭＣＰＤ酯的浓度　（ｐ．ｇ／ｋｇ）（以３一ＭＣＰＤ浓度计）计算线性回归方程。　以３倍信噪比（Ｓ／Ｎ＝３）作为检出限，ｌＯ倍信噪比　（Ｓ／Ｎ＝１０）作为定量限。在最优条件下，线性回归方　程、检出限和定量限的结果见表１。　墨　熊　堡立鎏旦塑　堡　方法　回归方程　相关系数　碱水解Ｙ＝Ｏ．７６５　４Ｘ＋０．０２４　１　０．９９９　８　５０—１２　０００　２．３．２精密度和回收率　以大豆油为基质，进行３个水平的３一ＭＣＰＤ　酯的加标回收试验，各加标水平重复６次，碱水解　方法下，３一ＭＣＰＤ的加标回收率为９４％一１０５％，　３一ＭＣＰＤ］￣测定结果的相对标准偏差（ＲＳＤ）为　３．７％一１０．８％。结果见表２。　表２　３一ＭＣＰＤ酯碱水解前处理方法回收率　注：ＮＤ表示未检出，余同。　通过回归方程、检出限、定量限、精密度及回收　率等方法学参数可知，回收率和精密度均符合ＧＢ／Ｔ　２７４０４－－２００８的要求。本方法对食用油中３一ＭＣＰＤ　酯的测定具有灵敏度高，特异性好，精密度高的特　点，能够满足Ｅｔ常检测的需求。　２．４实际样品检测　采用碱水解样品前处理方法建立的食用油中　３一ＭＣＰＤ酯的气相色谱一质谱检测方法对市场中常　见９种植物油中的３一ＭＣＰＤ酯含量进行了检测分　析，如表３所示，大豆油和橄榄油中未检出３一ＭＣＰＤ　酯。而花生油等食用油中３一ＭＣＰＤ酯均有检出。　其中，葵花籽油含量最低，棕榈油中含量最高，应进　一步加强对食用油中３一ＭＣＰＤ酯的监测和管理。　植物油脂中３一ＭＣＰＤ酯的形成尚未完全清晰，多数　研究表明是以酰基甘油为前体生成３一ＭＣＰＤ酯¨引。　可能是在油脂脱臭过程中甘油三酯直接被氯化生成　３一ＭＣＰＤ酯［１　２ｏ＿，或者甘油三酯先生成了环酰氧翁　离子再与氯离子反应生成３一ＭＣＰＤ酯　。　表３　９种食用油中３一ＭＣＰＤ酯的含量（以３一ＭＣＰＤ计）　食用油　含量／ｍｇ／ｋｇ　大豆油　花生油　菜籽油　棕榈油　芝麻油　玉米油　橄榄油　葡萄籽油　葵花籽油　研究显示，当温度超过２００　ｏＣ时，３一ＭＣＰＤ酯的　形成急剧增加，尤其是超过２４０　ｏＣ　。在大豆油精　炼过程中采用的是水化脱胶，在脱臭过程中酸性物　１３８　中国粮油学报　２０１６年第１１期　质较少，与氯离子的反应较少。而在棕榈油等植物　油的精炼过程中采用的是磷酸脱胶和活化白土脱色　的工艺　，高温脱臭过程中酸性条件较强，加大了氯　离子的取代反应，增加了３一ＭＣＰＤ酯的生成。因　此，大豆油中未检测到３一ＭＣＰＤ酯，而在棕榈油中　３一ＭＣＰＤ酯的含量较高，为７．３１　ｍｇ／ｋｇ。从国内外　近年来的相关报道可以知道，油脂精炼过程是产生　３一ＭＣＰＤ￣的主要途径，因此，在油脂精炼工序中，　要加强对一些工艺因素如加水量、酸用量、酸种类、　脱臭温度、脱臭时间等的控制和优化。　３　结论　本方法针对不同食用油对碱水解中所需水解时　间进行了优化，方法学考察结果显示，经优化的碱水　解方法具有定性准确，精密度高，灵敏度高等特点，　能满足对食用油中３一ＭＣＰＤ酯分析的要求。采用　本方法对市场中９种食用油的分析结果显示，除大　豆油、橄榄油外，均含有不同含量的３一ＭＣＰＤ酯，其　中，棕榈油含量最高，因此应加强对食用油中３一　ＭＣＰＤ酯的监管。　参考文献　［１］Ｄａｖｉｄｅｋ　Ｊ，Ｖｅｌｉｓｅｋ　Ｊ，Ｋｕｂｅｌｋａ　Ｖ，ｅｔ　ａ１．Ｇｌｙｃｅｒｏｌ　ｃｈｌｏｒｏｈｙ—　ｄｒｉｎｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｅｓｔｅｒ　ａｓ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｔｒｉｐａｌｍｉ－　ｔｉｎ，ｔｒｉｓｔｅａｒｉｎ　ａｎｄ　ｔｒｉｏｌｅｉｎ　ｗｉｔｈ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｃ　ａｃｉｄ［Ｊ］．Ｌｅｂ—　ｅｎｓｍｉｔｔｅｌ—Ｕｎｔｅｒｓｕｅｈｕｎｇ　ｕｎｄ—Ｆｏｒｓｃｈｕｎｇ，１９８０，１７　１：１４一　ｌ７　［２］Ｓｖｅｊｋｏｖｓｋａ　Ｂ，Ｎｏｖｏｔｎｙ　Ｏ，Ｄｉｖｉｎｏｖａ　Ｖ，ｅｔ　ａ１．Ｅｓｔｅｒｓ　ｏｆ　３一　ｃｈｌｏｒｏｐｒｏｐａｎｅ一１，２一ｄｉｏｌ　ｉｎ　ｆｏｏｄｓｔｕｆｆｓ［Ｊ］．Ｃｚｅｃｈ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０ｏ４，２２：１９０—１９６　［３］Ｄｏｌｅｚａｌ　Ｍ，Ｃｈａｌｏｕｐｓｋａ　Ｍ，Ｄｉｖｉｎｏｖａ　Ｖ，ｅｔ　ａ１．Ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ　ｏｆ　３一ｃｈｌｏｒｏｐｒｏｐａｎｅ一１，２一ｄｉｏｌ　ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ　ｅｓｔｅｒｓ　ｉｎ　ｃｏｆｆｅｅ［Ｊ］．　Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｆｏｏｄ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００５，２２１：２２１—２２５　［４］Ｚｅｌｉｎｋｏｖａ　Ｚ，Ｓｖｅｊｋｏｖｓｋａ　Ｂ，Ｖｅｌｉｓｅｋ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ　ｅｓ—　ｔｅｒｓ　ｏｆ３一ｃｈｌｏｒｏｐｒｏｐａｎｅ一１，２一ｄｉｏｌ　ｉｎ　ｅｄｉｂｌｅ　ｏｉｌｓ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ　ａｎｄ　Ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｔｓ，２００６，２３：１２９０—１２９８　［５］Ｋｕｎｔｚｅｒ　Ｊ，Ｗｅｉｓｓｈａａｒ　Ｒ．３一ＭＣＰＤ—Ｔｈｅ　ｓｍｏｋｉｎｇ　ｐｒｏｃｅｓｓ—　Ａｐｏｔｅｎｔ　ｓｏｕｒｃｅ　ｆｏｒ　３一ｃｈｌｏｒｏｐｒｏｐａｎｅ一１，２一ｄｉｏｌ（３一ＭＣＰＤ）　ｉｎ　ｍｅａｔ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ［Ｊ］．Ｄｅｕｔ　Ｌｅｂｅｎｓｍ　Ｒｕｎｄｓｃｈ，２００６，１０２：　３９７—４００　［６］Ｌａｒｓｅｎ　Ｊ　Ｃ．３一ＭＣＰＤ　ｅｓｔｅｒｓ　ｉｎ　ｆｏｏｄ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ［Ｍ］．Ｂｒｕｓ—　ｓｅｌｓ：ＩＬＳＩ　Ｅｕｒｏｐｅ。２００９：１—２５　［７］Ｈａｍｌｅｔｙ　Ｃ　Ｇ，Ｓａｄｄ　Ｐ　Ａ，Ｃｒｅｗｓ　Ｃ．Ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ　ｏｆ３一ｃｈｌｏｒｏ—　ｐｒｏｐａｎｅ一１，２一ｄｉｏｌ（３一ＭＣＰＤ）ａｎｄ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｉｎ　ｆｏｏｄｓ：ａ　ｒｅｖｉｅｗ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ　ａｎｄ　Ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｔｓ，　２００２，１９：６１９—６３１　［８］赵丹宇．氯丙醇安全性的最新评价［Ｊ］．中国食品法典通　讯，２００１（４）：１９—２ｌ　Ｚｈａｏ　Ｄａｎｙｕ．Ａ　ｎｅｗ　ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓａｆｅｔｙ　ｏｆ　ｃｈｌｏｒｏｐｒｏ—　ｐａｎｏｌｓ［Ｊ］．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｆｏｏｄ　Ｃｏｄｅ　Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ，２００１，４：１９　—２１　［９］张蕊，谢刚，张艳，等．食用油中３一氯一１，２一丙二醇酯　检测方法的研究进展［Ｊ］．中国粮油学报，２０１２（１２）：　１２２—１２８　Ｚｈａｎｇ　Ｒｕｉ，Ｘｉｅ　Ｇａｎｇ，Ｚｈａｎｇ　Ｙａｎ，ｅｔ　ａ１．Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　３一ｃｈｌｏｒｏｐｒｏｐａｎｅ一１，２一ｄｉｏｌ（３　一ＭＣＰＤ）［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ　Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃｅｒｅａｌｓ　ａｎｄ　Ｏｉｌｓ，　２０１２，１２：１２２—１２８　［１０］王力清，陈洪涛，黄翠莉，等．食用油脂中３一ＭＣＰＤ脂　肪酸酯和缩水甘油脂肪酸酯分析方法研究进展［Ｊ］．粮　食与油脂，２０１４（４）：６—９　Ｗａｎｇ　Ｌｉｑｉｎｇ，Ｃｈｅｎ　Ｈｏｎ￣ａｏ，Ｈｕａｎｇ　Ｃｕｉｌｉ，ｅｔ　ａ１．Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　３一ＭＣＰＤ　ｅｓｔｅｒｓ　ａｎｄ　ｇｌｙｃｅｒｏｌ　ｅｓｔｅｒ　ｆａｔｔｙ　ｉｎ　ｅｄｉｂｌｅ　ｏｉｌｓ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｏｉｌ，２０１４　（４）：６—９　［１　１］Ｗｅｎｚｌ　Ｔ，Ｕｌｂｅｒｔｈ　Ｆ．Ｐｒｏｉｆｃｉｅｎｃｙ　ｔｅｓｔ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　３一ＭＣＰＤ　ｅｓｔｅｒｓ　ｉｎ　ｅｄｉｂｌｅ　ｏｉｌ［ＥＢ／ＯＬ］．ＪＲＣ　Ｓｃｉｅｎｔｉｉｆｃ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ　Ｒｅｐｏｒｔｓ，２０１０，ＥＵＲ　２４３５６　ＥＮ．ｈｔｔｐ：／／ｉｍｒｍ．　ｊｒｃ．ｅｅ．ｑｕｒｏｐａ．ｅｕ／ｈｔｍｌ／ｉｎｔｅｒｌａｂｏｒａｔｏｒｙ—ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ／３一　ｍｃｐｄ／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍ　［１２］Ｗｅｉｓｓｈａａｒ　Ｒ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　３一ｃｈｌｏｒｏｐｒｏｐａｎｅ一１，　２——ｄｉｏｌ　ｉｎ　ｅｄｉｂｌｅ　ｏｉｌ　ｂｙ　ＧＣ——ＭＳ　ａｆｔｅｒ　ｅｓｔｅｒ　ｃｌｅａｖａｇｅ　ｗｉｔｈ　ｓｏｄｉｕｍ　ｍｅｔｈｏｘｉｄｅ［Ｊ］．Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｌｉｐｉｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００８，１１０：１８３—１８６　［１３］Ｚｅｌｉｎｋｏｖａ　Ｚ，Ｓｖｅｊｋｏｖｓｋａ　Ｂ，Ｖｅｌｉｓｅｋ　Ｊ．Ｆａｔｔｙ　ａｃｉｄ　ｅｓｔｅｒｓ　ｏｆ　３　一ｃｈｌｏｒｏｐｒｏｐａｎｅ—ｒ，２一ｄｉｏｌ　ｉｎ　ｅｄｉｂｌｅ　ｏｉｌｓ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ａｄｄｉ—　ｉｆｖｅｓ　ａｎｄ　Ｃｏｎｔｍｉｎａｎｔｓ，２００６，２３：１２９０—１２９８　［１４］Ｋｕｈｌｍａｎｎ　Ｊ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｏｕｎｄ　２，３一ｅｐｏｘｙ一１一ｐｒｏ—　ｐａｎｏｌ（ｇｌｙｃｉｄｏ１）　ａｎｄ　ｂｏｕｎｄ　ｍｏｎｏｃｈｌｏｒｏｐｒｏｐａｎｅｄｉｏｌ　（ＭＣＰＤ）ｉｎ　ｒｅｉｆｎｅｄ　ｏｉｌｓ［Ｊ］．Ｅｕｒ　Ｊ　Ｌｉｐｉｄ　Ｓｃｉ　Ｔｅｃｈｎｏｌ，　２０１１，１１３：３３５—３４４　［１５］王卫华，徐锐锋，刘军，等．５种食品中氯丙醇测定方法　研究进展［Ｊ］．化学分析计量，２００７，１６：７４—７６　Ｗａｎｇ　Ｗｅｉｈｕａ，Ｘｕ　Ｒｕｉｆｅｎｇ，Ｌｉｕ　Ｊｕｎ，ｅｔ　ａ１．Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｐｒｏ—　ｒｇｅｓｓ　ｏｎ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｈｌｏｉｒｎｅ　ａｌｃｏｈｏｌ［Ｊ］．　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ，２００７，１６：７４—７６　［１６］严小波，吴少明，里南，等．油脂性食品中脂肪酸氯丙　醇酯检测方法的研究进展［Ｊ］．色谱，２０１３，２：９５—１０１　Ｙａｎ　Ｘｉａｏｂｏ，Ｗｕ　Ｓｈａｏｍｉｎｇ，Ｌｉ　Ｎａｎ，ｅｔ　ａ１．Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｐｒｏ—　ｇｒｅｓｓ　ｏｆ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｃｈｌｏｒｉｄｅ　ｉｓｏｐｒｏｐｙｌ　ｅｓｔｅｒ　ｉｎ　ｏｉｌｓ　ａｎｄ　ｆａｔｓ［Ｊ］．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，２０１３，２：９５—１０１　［１７］傅武胜，严小波，吕华东．气相色谱一质谱法测定植物　油中脂肪酸氯丙醇酯［Ｊ］．分析化学，２０１２，４０：１３２９—　１３３５　第３１卷第１１期　苗雨田等气相色谱一质谱法测定食用油中３一氯丙醇酯　ｓｈｏｐ　ｏｎ　３一ＭＣＰＤ　Ｅｓｔｅｒｓ，２００９　１３９　Ｆｕ　Ｗｕｓｈｅｕｇ，Ｙａｎ　Ｘｉａｏｂｏ，Ｌｆｉ　Ｈｕａｄｏｎｇ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｈｌｏｒｉｄｅ　ｉｓｏｐｒｏｐｙｌ　ｅｓｔｅｒ　ｉｎ　ｖｅｇｅｔａｂｌｅ　ｏｉｌｓ　ｂｙ　ｇａｓ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａ—　［２１］Ｈｅｍｌｅｔ　Ｃ　Ｇ，Ｓａｄｄ　Ｐ　Ａ，Ｇｒａｙ　Ｄ　Ａ．Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｏｎｏ　ｃｈｌｏｒｏｐｒｏｐａｎｅｄ　ｉｏｌ（ＭＣＰＤｓ）ｉｎ　ｍｏｄｅｌ　ｄｏｕｇｈ　ｓｙｓｔｅｍｓ　Ｌ．　ｐｈｙ／ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ［Ｊ］．Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｙ，２０１２，ｒ　４０：１３２９—１３３５　１ｅａｖｅｎｅｄ　ｄｏｕｇｈｓ［Ｊ］．Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，　２００４，５２：２０５９—２０６６　［１８］Ｒａｈｎ　Ａ　Ｋ　Ｋ，Ｙａｙｌａｙａｎ　Ｖ　Ａ．Ｗｈａｔ　ｄｏ　ｗｅ　ｋｎｏｗ　ａｂｏｕｔ　ｔｈｅ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　３一ＭＣＰＤ　ｅｓｔｅｒ　ｆｏｍ　ａｃｔｒｉｏｎ？［Ｊ］．　Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｌｉｐｉｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１　１，　１１３：３２３—３２９　［２２］杨娇，金青哲．食用植物油中３一氯丙醇酯的研究进展　［Ｊ］．中国油脂，２０１１（９）：１—４　Ｙａｎｇ　Ｊｉａｏ，Ｊｉｎ　Ｊｉｎ．Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｏｆ　３一ＭＣＰＤ　ｅｓｔｅｒｓ　［１９］Ｓｖｅｊｋｏｖｓｋａ　Ｂ，Ｄｏｌｅｚａｌ　Ｍ，Ｖｅｌｉｓｅｋ　Ｊ．Ｆｏｒｍ　ａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｄｅ—　ｔｏｍ　ｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｏｆ　３一ｃｈｌｏｒｏｐｒｏｐａｎｅ一１。２一ｄｉｏｌ　ｅｓｔｅｒｓ　ｉｎ　ｉｎ　ｅｄｉｂｌｅ　ｖｅｇｅｔａｂｌｅ　ｏｉｌ［Ｊ］．Ｃｈｉｎａ　Ｏｉｌｓ　ｎｄ　Ｆａｔａｓ，２０１１（９）：　ｌ一４　ｍｏｄｅｌｓ　ｓｉｍｕｌａｔｉｎｇ　ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ　ｆｏｏｄｓ［Ｊ］．Ｃｚｅｃｈ　Ｊ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉ・　ｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００６，２４：１７２—１７９　［２３］Ｒａｍｌｉ　Ｍ　Ｒ，Ｓｉｅｗ　Ｗ　Ｌ，Ｉｂｒａｈｉｍ　Ｎ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｄｅ—　ｇｕｍｍｉｎｇ　ａｎｄ　ｂｌｅａｃｈｉｎｇ　ｏｎ　３ＭＣＰＤ　ｅｓｔｅｒｓ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｄｕｒｉｎｇ　［２０］Ｙａｙｌａｙａｎ　Ｖ　Ａ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　３一ＭＣＰＤ　ｅｓｔｅｒｓ　ｐｈｙｓｉｃａｌ　ｒｅｆｉｎｉｎｇ［Ｊ］．Ｊ　Ａｍ　Ｏｉｌ　Ｃｈｅｍ　Ｓｏｃ，２０１１，８８　（１１）：１８３９—１８４４．　ｏｒｆｍ　ａｃｔｉｏｎ：ｆａｃｔｓ　ａｎｄ　ｈｙｐｏｔｈｅｓｉｓ［Ｒ］．Ｂｅｌｇｉｕｍ：ＩＬＳＩＷｏｒｋ—　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　３一ｃｈｌｏｒｏｐｒｏｐａｎｏｌ一１，２一ｄｉｏｌ（３一ＭＣＰＤ）　Ｅｓｔｅｒｓ　ｉｎ　Ｅｄｉｂｌｅ　Ｏｉｌ　ｂｙ　Ｇａｓ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ａｎｄ　Ｍａｓｓ　Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ　Ｍｉａｏ　Ｙｕｔｉａｎ　Ｙａｎｇ　Ｙｏｕｙｏｕ　Ｗａｎｇ　Ｈａｏ　Ｌｉｕ　Ｔｏｎｇ　Ｙａｎｇ　Ｙｏｎｇｔａｎ　（Ｃｈｉｎａ　Ｏｉｌ　Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｈｅａｌｔｈ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｎｕｔｉｒｔｉｏｎ　Ｈｅａｌｔｈ　ａｎｄ　Ｆｏｏｄ　Ｓａｆｅｔｙ　Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０２２０９）　Ａｂｓｔｒａｃｔ　３一ｃｈｌｏｒｏｐｒｏｐａｎｏｌ一１，２一ｄｉｏｌ（３一ＭＣＰＤ）ｅｓｔｅｒｓ　ｉｎ　ｅｄｉｂｌｅ　ｏｉｌ　ｗａｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ａｌｋａｌｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｌｙ—　ｓｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ａｎｄ　ｇａｓ　ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ／ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｙ（ＧＣ—ＭＳ）ｂａｓｒｅｄ　ｏｎ　ｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｐｈｅｎｙｌｂｏｒｏｎｉｃ　ａｃｉｄ　（ＰＢＡ）．Ｔｈｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｓｈｏｗｓ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　ｔｉｍｅ　ｗａｓ　ａ　ｃｒｉｔｉｃａｌ　ｆａｃｔｏｒ　ｉｎ　ａｌｋａｌｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　ｓａｍｐｌｅ　ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　ｔｉｍｅ　ｏｆ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｅｄｉｂｌｅ　ｏｉｌｓ　ｒａｎｇｅｓ　ｆｒｏｍ　１　ｍｉｎ　ｔｏ　６　ｍｉｎ　ｕｐｏｎ　ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ，ｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙ　ａｎｄ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｌｉｍｉｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ａｌｋａｌｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗｅｒｅ　ｅｖａｌｕａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｓｏｙｂｅａｎ　ｏｉｌｓ　ａｓ　ｔｈｅ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｍｏｄｅ１．Ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｔｈｒｅｅ　ｌｅｖｅｌｓ　ｍａｒｋｉｎｇ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　１５０—１　５００　ｇ／ｋｇ，ｔｈｅ　ｒｅｃｏｖｅｒｙ　ｗａｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　９４％ａｎｄ　１０５％，ｗｈｉｌｅ　ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｄｅｖｉａｔｉｏｎ　ｒａｎｇｅｓ　ｒｆｏｍ　３．７％～１０．８％．Ｉｎ　ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅ　ｌｉｍｉｔ　ｏｆ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ（ＬＯＤ）ａｎｄ　ｔｈｅ　ｌｉｍｉｔ　ｏｆ　ｑｕａｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　１５　ｇ／ｋｇ　ａｎｄ　５０　ｇ／ｋｇ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｉｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｃｏｕｌｄ　ｍｅｅｔ　ｗｉｔｈ　ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｏｕｔｉｎｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　３一ｃｈｌｏｒｏｐｒｏｐａｎｏｌ一１，　２一ｄｉｏｌ（３一ＭＣＰＤ）ｅｓｔｅｒｓ　ｉｎ　ｅｄｉｂｌｅ　ｏｉｌ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　３一ｃｈｌｏｒｏｐｒｏｐａｎｏｌ一１，２一ｄｉｏｌ　ｅｓｔｅｒｓ，ｅｄｉｂｌｅ　ｏｉｌ，ａｌｋａｌｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ，ｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ　ｔｉｍｅ，ｇａｓ　ｃｈｒｏ—　ｍａｔｏｇｒａｐｈｙ／ｍａｓｓ　ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ