污染土壤中农药的微生物降解研究进展

第ｌ９卷　第６期　黑龙江八一农垦大学学报　ｌ９（６）：３４～３７　２００７焦　ｌ２月　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ　Ａｕｇｕｓｔ　Ｆｉｒｓｔ　Ｌａｎｄ　Ｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｄｅｃ．２０ｏ７　文章编号：１　００２—２０９０（２００７）０６．００３４．０４　污染土壤中农药的微生物降解研究进展　郑树生　，孙海燕　，李桂霞　２　马汇泉　２　（１．黑龙江八一农垦大学植物科技学院，　大庆１６３３１９；２．山东理工大学生命科学学院）　摘　要：农药，尤其是高毒、高残留、难降解的化学农药是重要的环境污染物，而用微生物治理农药污染是一项　有效手段，几十年来，在这方面已进行了大量研究。有机磷农药、拟除虫菊酯类农药、均三氮苯类农药是三种最常　见的农药，本文综述了降解这三种农药的常见微生物种类和国内外研究进展，简要介绍了微生物降解农药的降解机　理，并在高效农药降解工程菌的构建、混合菌的培养、降解酶或降解基因的改良、降解菌的固定化等方面展望了微　生物降解农药的研究方向，最后指出了农药微生物降解研究领域的发展趋势和有待进一步解决的问题。　关键词：农药；微生物降解；工程菌　中图分类号：Ｘ５３　文献标识码：Ａ　Ｐｒｏｃｅｓｓ　ｉｎ　Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ　Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ｉｎ　Ｐｏｌｌｕｔｅｄ　Ｓｏｉｌ　ＺＨＥＮＧ　Ｓｈｕ—ｓｈｅｎｇ，ＳＵＮ　Ｈａｉ—ｙａｎ，ＬＩ　Ｇｕｉ—ｘｉａ，ＭＡ　Ｈｕｉ—ｑｕａｎ　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｆａｒｍ　ｃｈｅｍｉｃａｌｓ，ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙ　ｔｈｏｓｅ　ｈｉｇｈｌｙ　ｔｏｘｉｃ，ｈｉｇｈｌｙ　ｒｅｓｉｄｕａｌ　ａｎｄ　ｈａｒｄ　ｔｏ　ｄｅｇｒａｄｅ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅ，ａｒｅ　ｓｅｖｅｒｅ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　ｐｏｌｌｕｔａｎｔｓ．Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅ　ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｂｙ　ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ　ｉｓ　ｏｎｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｏｗｅｒｆｕｌ　ｍｅａｎｓ　ｔｏ　ｔｒｅａｔ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅ　ｐｏｌｌｕｔｉｏｎ．Ｍａｎｙ　ｒｅｓｅａｒｃｈｅｒｓ　ｈａｖｅ　ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ　ｌｏｔｓ　ｏｆ　ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　ｉｔ．　Ｏｒｇａｎｉｃ—ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｕｓ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ｐｙｒｅｔｈｒｏｉｄｓ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ｔｒｉａｚｉｎｅ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ａｒｅ　ｔｈｅ　ｔｈｒｅｅ　ｍｏｓｔ　ｃｏｍｍｏｎ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ．Ｉｎ　ｔｈｅ　ａｒｔｉｃｌｅ，ｔｈｅ　ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｃａｐａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｄｅｇｒａｄｉｎｇ　ｔｈｅ　ｔｈｒｅｅ　ｃｏｍｍｏｎ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ａｄｖａｎｃｅｓ　ｗｅｒｅ　ｒｅｖｉｅｗｅｄ，ｔｈｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｏｆ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ｄｅｇｒａｄｉｎｇ　ｂｙ　ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ　ｗｅｒｅ　ｂｒｉｅｆｌｙ　ｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄ，ｆｕｒｔｈｅｒ　ｍｏｒｅ，ｔｈｅ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｎ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ　ｂａｃｔｅｒｉａ，　ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉｘｅｄ　ｂａｃｔｅｒｉａ，ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｄｅｇｒａｄｉｎｇ　ｅｎｚｙｍｅ　ａｎｄ　ｇｅｎｅｓ，ｆｉｘａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｅｇｒａｄｅｄ　ｂａｃｔｅｒｉａ　ｗｅｒｅ　ｐｒｏｓｐｅｃｔｅｄ．Ｆｉｎａｌｌｙ，ｔｈｅ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｔｒｅｎｄｓ　ｉｎ　ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ　ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｂｙ　ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｒｏｂｌｅｍｓ　ｔｏ　ｂｅ　ｓｏｌｖｅｄ　ｗｅｒｅ　ｐｏｉｎｔｅｄ　ｏｕｔ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ；Ｍ　ｉｃｒｏｂｉａｌ　Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ；ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ　ｂａｃｔｅｒｉａ　０　．＾刖舌　』．—Ｊ　我国是个农业大国，农药，尤其是化学农药的使用，依然是目前保证粮食作物增产的有效手段。　然而，农药不仅污染土壤环境和农作物，而且还进一步污染到地面水体和地下水以及海洋环境，直　接威胁着人类的生存环境和身体健康。为了解决这个矛盾，一方面需要开发高效、低毒、低残留的　化学农药或生物农药，另一方面则是要找到能够高效、快速降解农药残留的制剂。　大量研究证明，自然环境中存在的多种微生物在农药降解方面起着重要的作用，科研工作者通　过富集培养、分离筛选等技术已发现了许多能够降解农药的微生物。近年来，随着有机磷类农药的　大量使用和拟除虫菊酯类、除草剂类农药的兴起，围绕这类农药的降解微生物的筛选与研究工作取　得了一定的进展。　收稿日期：２００７—１卜２１　项目来源：省科技厅项目“寒地条件下土壤生物活化剂菌种筛选与复配技术研究”（９５５１０５４）；省国际合作项目“环保型生　物降解增效剂的研制与开发”（ｗｃ０２２０８）。　作者简介：郑树生（１９６６一），男，实验师，黑龙江八一农垦犬学毕业，现主要从事农业仪器分析的科研工作。　维普资讯 http://www.cqvip.com 第６期　郑树生等：污染土壤中农药的微生物降解研究进展　３５　１　降解农药的主要微生物　有机磷农药是目前使用量最大的农药之一，属高毒农药，有一定的残留期，对硫磷（Ｐａｒａｔｈｉｏｎ）　为其代表品种。有机磷易被微生物体内有机磷水解酶水解，因而可用微生物法进行去毒。目前，已　发现降解有机磷类农药的微生物有假单胞菌属中的施氏假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　Ｓｔｕｔｚｅｒｉ）、嗜中温　假单胞菌（　ｍｅｓｏｐｈｉ］ｉｃａ）、　铜绿假单胞菌（　ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）和类产碱假单胞菌　（　Ｐｓｅｎｄ－ｏａＪｃａＪｉｇｅｓ）；芽胞杆菌属中的地衣芽胞杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ］ｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）和蜡样芽胞杆菌　（　ＣＯＣＯＨＳ）；真菌中有华丽曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｏｒｓｎｔｕｓ）和鲁氏酵母菌（ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ　ｒｏｕｘｉｉ）；　此外，在不动杆菌属（Ａｃｉｎｅｔｏｂｏｃｔｅ，）、黄杆菌属（　ａｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、邻单胞菌属（Ｐ］ｅｓｉｏｍｏｎａ５）也　分离到降解此类农药的微生物。中山大学李荷、梁卫驱等发现了一株新耐冷菌ＳＡ一８可以降解有机　磷农药，此菌属于邻单胞菌属，菌株ｓＡ一８能够利用甲基对硫磷或对硝基苯酚在２０℃快速生长，在　生长过程中唯一碳源甲基对硫磷的浓度明显降低，与此同时伴随着降解产物对硝基苯酚浓度的增　加；经过一段时间的诱导或耐受过程，菌株会利用二次底物对硝基苯酚为碳源和能源继续生长…。　南京信息工程大学周军英等发现一株巨大芽胞杆菌ＬＹ一４对土壤中杀虫单农药有降解作用，没有外　加菌时，杀虫单农药在土壤中的降解是缓慢的，加入降解菌后可使杀虫单农药的降解大大加快　。　国家环境保护总局石利利、林玉锁等发现假单胞菌（ＤＬＬ一１）在水溶液介质中降解甲基对硫磷的性能　与影响因素及其降解机理　。中山大学生命科学学院刘玉焕等对华丽曲霉Ｚ５８有机磷农药降解酶进　行纯化，发现此酶对许多有机磷农药都有很好的降解作用　。王银善等分离到一株黄杆菌　ｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｓｐ　Ｐ３—２，该菌有广泛的底物适应能力，可降解对硫磷、杀螟松、水胺硫磷、甲基　对硫磷，性能稳定，其又分离到一株Ｐｓｅｕｄｏｍａｎａｓ　Ｗｓ一５对甲胺磷有很强的降解能力，能利用甲胺　磷为唯一碳源进行生长　。海洋微生物对有机磷农药也有一定的降解作用，厦门大学郑天凌从沿岸　海域分离到有机磷农药耐药菌，对有机磷农药有良好的分解作用…。有机磷农药降解菌的分离对于　应用到环境中以消除化学农药污染具有广阔前景，但由于降解菌株生长大都非常缓慢，了实际　作用。国外己开始了构建高效降解菌株的工作。ｗｉｌｆｒｅｄ　Ｃｈｅｎ构建的带有有机磷水解酶基因的工程　大肠杆菌，能够快速降解有机磷农药　。山东农业大学闫艳春、姚良同等用抗性库蚊酯酶基因，引　入原核表达载体ｐＲＬ４３９　，转化大肠杆菌ＨＢ１０１细胞，获得表达，通过酶切、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交鉴定重组　质粒，研究了重组酯酶的活性，重组质粒ｐＲＬ—Ｂ１表达的酯酶具有高酶活并能高效降解酯酶的特异性　底物。一乙酸萘酯（ｏ—ＮＡ）和１３一乙酸萘酯（１３一ＮＡ），经对重组菌进行细胞固定化后降解有机磷农　药对硫磷，反应时间短，降解效率高　“　。Ｓｅｄｅｒ＆ｇｉｂｓｏｎ从　ｖｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ中克隆了有机磷降解基因　ｏｐｄ，并在外源宿主中表达；Ｓｔｅｉｃｒｔ＆ｃｏｗｏｒｋｅｒｓ开展了ｏｐｄ基因在Ｇ＋菌中表达的工作，他们将得　到的ｏｐｄ基因转化到Ｓｔｒｅｔｏｍｙｃｅｓ　ｌ，ｖｉｄａｎｓ中，发现对硫磷降解酶分泌到了培养基中，这为制备　对硫磷水解酶用于农药降解提供了降低成本的希望。　拟除虫菊酯类农药降解菌主要有产碱菌属（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）。浙江农业大学虞云龙等从浙江农业　大学蚕沙坑污泥中分离到能以部分拟除虫菊酯和一硫代磷酸酯类杀虫剂为唯一碳源和能源生长的　降解菌Ｙ　Ｆ　０５，经鉴定，降解菌为假单胞菌属的种（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ｓｐ），分离株Ｙ　Ｆ　０５可以以氰戊菊　酯、甲氰菊酯、氯氰菊酯、对硫磷、甲基对硫磷、杀螟松为唯一碳源和能源生长…　；后又从杭州农　药厂废水排放口污泥中分离到１株能降解部分拟除虫菊酯和一硫代磷酸酯类杀虫剂的广谱性降解菌　ＹＦ１１　，分离菌株被鉴定为产碱菌属（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）的一个未知种，该分离菌株可降解氰戊菊酯、　溴氰菊酯、三氟氯氰菊酯、甲氰菊酯、氯氰菊酯、氯菊酯、对硫磷、甲基对硫磷、杀螟松等农药。　福建农林大学王兆守等将阴沟肠杆菌ｗｌ０ｊ１５菌株经紫外线诱变后，筛选出几株突变株对拟除虫菊　酯类农药有很好的降解作用　。　均三氮苯类农药广泛地用于对作物杂草的控制，阿特拉津是其代表品种。这类化合物残留期较　长，在土壤中降解缓慢，在寒冷地带可残留一季，其残留对苜蓿、大豆等作物有药害。西吗嗪是均　三氮苯类农药中被研究较多的农药，其降解菌的研究报道相对较多，有农杆菌属（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、　维普资讯 http://www.cqvip.com ３６　黑龙江八一农垦大学学报　第ｌ９卷　假单胞菌属、芽胞杆菌属、真菌中的某些属等。国外报导了３株假单胞菌（Ａ、Ｄ和Ｅ）和２株肺炎克　雷伯氏菌（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　Ｐｎｅｕｍｏｎｉｅａ）（９０和９９）可以均三氮苯类农药为唯一碳源进行生长，这些假　单胞菌和克雷伯氏菌具有氨基水解酶（ＥＣ３．４．５）特性。Ｃｏｏｋ和Ｈｕｎｔｅｒ分离到一株珊瑚红球菌　（Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ　ｃｏｒａｌｌｉｎｕｓ）具有水解Ｄｅｅｔｈｙｌ　ｓｉｍａｚ　ｉｎｅ的能力，他们初步纯化了其水解酶；Ｗａｌ　ｔｅｒ　从尼ｃｏｒａｌｌｉｎｕｓ　ＮＲＲＬＢ－１５４４４Ｒ中纯化并鉴定了可诱导的均三氮苯降解酶：Ｂｈａｒａｔ　Ｂｈｕｓｈａｎ、Ｓｕｄｉｐ　Ｋ．Ｓｍａｎｔａ等从被农药污染的样本中分离了一株有活力的Ｒａｌｓｔｏｎｉａ　ｓｐ．ＳＪ９８，它能利用３－Ｍｅｔｈｙｌ一　４－Ｎｉｔｒｏｐｈｅｎｏｌ作为唯一的碳源和能源“　。Ｒａｍ　Ｂｅｈｋｉ等研究了不同红球菌菌株对阿特拉津的降解，　他们测定了ＴＥｌ、ＴＥ３、ＴＥ７等１３个红球菌菌株，发现有几个菌株具有降解阿特拉津的能力，其中　ＴＥＩ、Ｂ３０去除率达９０％。　上述降解菌中的曲霉菌、酵母菌及不动杆菌微生物均是近几年新发现的种，此外，利用白腐真　菌（ｗｈｉｔｅ－ｒｏｔ　ｆｕｎｇｕｓ）降解农药的研究也已成为热点。常见农药降解微生物，见表１“　。　表１常见农药的降解微生物　农药　降解菌　甲胺磷　芽孢杆菌、曲霉、青霉、假单胞菌、瓶型酵母　阿特拉津　假单胞菌、烟曲霉、焦曲霉、葡枝根霉、串珠镰刀霉、粉红色镰刀霉、尖孢镰刀霉、斜卧镰刀霉、　微紫青霉、自腐真菌、诺卡氏菌、红球菌　敌杀死　产碱杆菌　２．４一Ｄ　无色杆菌、节杆菌、曲霉菌、棒状杆菌、黄杆菌、诺卡氏菌、假单胞菌　ＤＤＴ　无色杆菌、气杆菌、芽胞杆菌、梭状芽胞杆菌、埃希氏菌、镰孢霉菌、诺卡氏菌、变形杆菌、链　球菌、曲霉菌、黄单胞杆菌属、节细菌　丙体六六六　自腐真菌、梭状芽胞杆菌、埃希氏菌　对硫磷　大肠杆菌、芽胞杆菌、短杆菌属、固氮极毛杆菌属　甲拌磷　硫杆菌、假单胞菌　、　敌百虫　曲霉菌、镰孢霉菌、青霉菌　敌敌畏　假单胞菌、木霉属　七氯　芽胞杆菌、镰孢霉菌、小单孢菌、诺卡氏菌、曲霉菌、根霉菌、链球菌、木霉菌、节细菌　２，４，５一Ｔ　无色杆菌、枝动杆菌　狄氏剂　芽胞杆菌、假单胞菌、微球菌属、气杆菌属、青霉菌、诺卡氏菌属　艾氏剂　镰孢霉菌、青霉菌、芽胞杆菌属、微球菌属、诺卡氏菌属、链霉属　乐果　假单孢菌　灭草隆　八叠球菌属、曲霉菌　２微生物降解农药的机理　微生物对农药的作用方式可分为两大类：一类是微生物直接作用于农药，通过酶促反应降解农　药，常说的农药微生物降解多属于此类，微生物通过酶促反应降解农药的方式主要有氧化、脱氢、　还原、水解、合成等几种反应类型；另一类是通过微生物的活动改变了化学和物理的环境而间接作　用于农药。常见的作用方式有矿化作用、共代谢作用、生物浓缩或累积作用和微生物对农药的间接　作用【ｌ７】。　３　展望　目前，对于农药降解微生物的研究还存在很多问题，大部分的工作还只局限于实验室，还不能　完全使农药降解菌从实验室走向实际应用。这是因为，农药污染环境的化合物组成很不稳定，经常　波动，对于农药降解菌的生长很不利，温度、ｐＨ及湿度波动也较大，有可能抑制降解菌的生长；直　维普资讯 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第６期　郑树生等：污染土壤中农药的微生物降解研究进展　３７　接从环境中筛选获得的农药降解菌降解速度慢，不能满足实际需要或经常发生变异导致降解能力的　丧失，不能够继续降解农药等。　今后的微生物降解农药的研究方向主要有以下几方面：　（１）高效农业降解工程菌的构建　通过基因重组技术将不同降解农药质粒或降解农药基因转化到降解菌内或组建到同一菌株内，　构建降解谱广，降解彻底的“超级细菌”，从而就扩大降解菌对农药的降解范围，提高其治理效果，　增强其净化环境的作用。　（２）混合菌的培养　如果两种微生物在共同存在时才能降解某种农药，单独存在时不能降解该农药，这时，可以采　用原生质体融合技术融合这两种微生物，融合子就会具备两个亲本的基因与优点“　”　。　（３）降解酶或降解基因的改良　通常，人们直接从自然界筛选的降解菌的降解酶活性较低，不能满足实际需要。可以通过定向　诱变、随机突变或ＤＮＡ重组等分子生物学技术来提高其活性，以增强降解菌对污染物的降解能力。　（４）降解菌的固定化　投放到环境中去的降解菌还会受到该环境原有菌群的影响，甚至受到拮抗而不能在该环境中长　期生存，农药降解菌在受污染环境中不能成为优势菌，可以通过生物学技术改善降解菌的定殖能力、　稳定性。　（５）多种方法综合利用　另外，白腐真菌降解农药的研究和农药生物降解的模型定量化研究也是目前的主要研究方向，　有待进一步研究的问题还有许多。具体有：如何在自然界中筛选多功能微生物资源；如何克服影响　微生物降解效果的各种因子；构建的工程菌及其农药降解质粒的稳定性及菌种的安全管理；对　于农药微生物降解制剂产品，其降解农药能力的评价及产品进人市场的管理应及相应的配套法制法　规等等ｎ　。这些问题的解决，必将推动农药微生物降解的研究进入更高领域，推动农药残留降解菌　剂的广泛应用，解决好环境中的农药污染问题。　参考文献：　［Ｉ］李荷，梁卫驱，吴小映，等．一株新耐冷菌ＳＡ一８降解有机磷农药的研究［Ｊ］．中山大学学报，２００４，４３（３）：　ｌ３　ｌ—ｌ３２．　［２］周军英，林玉锁，徐亦刚，等．巨大芽抱杆菌ＬＹ一４对土壤中杀虫单农药的降解［Ｊ］．中国环境科学，２０００，２０　（６）：５ｌ１－５１４．　［３］石利利，林玉锁，徐亦钢，等．ＤＬＬ一１菌对甲基对硫磷农药的降解作用及其降解机理［Ｊ］．农村生态环境，２００２，　１８（３）：２６—２９．　［４］石利利，林玉锁，徐亦钢，等．ＤＬＬ一１菌在土壤中对甲基对硫磷农药的降解性能与影响因素研究［Ｊ］．环境科学　学报，２００Ｉ，２Ｉ（５）：５９７—６００．　［５］刘玉焕，钟英长．华丽曲霉Ｚ５８有机磷农药降解酶的纯化和性质［Ｊ］．微生物学报，２０００，４０（４）：４３０—４３４．　［６］崔中利，李顺鹏．化学农药的微生物降解及其机制［Ｊ］．江苏环境科技，１９９８，（３）：１—４．　［７］郑天凌，林良牧，王斐．海洋微生物对甲胺磷农药的降解作用［Ｊ］．海峡，１９９９，１８（１）：９５—９９．　［８］伍宁丰，梁果义，邓敏捷，等．有机磷农药降解酶及其基因工程研究进展［Ｊ］．生物技术通报，２００３，（５）：９—１２．　［９］闻艳春，乔传令，周晓涛．一种工程菌的高酶活及其固定化细胞对农药的降解［Ｊ］．中国环境科学，１９９９，１９（５）：　４６ｌ一４６５．　［１０］闰艳春，姚良同，宋晓妍，等．工程菌及其固定化细胞对有机磷农药的降解［Ｊ］．中国环境科学，２００Ｉ，２Ｉ（５）：　４ｌ２—４ｌ６．　［ＩＩ］虞云龙，盛国英，傅家谟，等．一株农药降解菌的分离与鉴定［Ｊ］．华南理工大学学报，１９９６，１８（５）：１５－２０．　［１２］虞云龙，宋凤鸣，郑重，等．一株广谱性农药降解菌（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅ　ｓｓｐ．）的分离与鉴定［Ｊ］．浙江农业大学学报，　１９９７，２３（２）：ｌｌｌ—ｌｌ５．　［１３］王兆守，粱小虾，李秀仙，等．拟除虫菊酯类农药降解菌的紫外线诱变［Ｊ］．华东昆虫学报，２００３，１２（２）：　８２—８６．　［１４］Ｂｈｕｓｈａｎ　Ｂ，Ｓａｍａｎｔａ　ＳＫ，Ｃｈａｕｈａｎ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｃｈｅｍｏｔａｘｉ　Ｓ　ａｎｄ　ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ　ｏｆ　３－Ｍｅｔｈｙ卜４一Ｎｉｔｒｏｐｈｅｎｏｌ　ｂｙ　Ｒａｌｓｔｏｎｉａ　ｓｐ．￥９８［Ｊ］．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎｄ　ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｃｏｍｍｉｃａｔｉｏｎｓ，２０００，２７５（１）：１２９—１３３．　［１５］虞云龙，樊德方，陈鹤鑫．农药微生物降解的研究现状与发展策略［Ｊ］．环境科学进展，１９９６，４（３）：２８—３６．　［ｔ６］郑金来，李君文，晁福寰．常见农药降解微生物研究进展及展望［Ｊ］．环境科学研究，２００１，１４（２）：６２—６４．　［１７］杨小红，李俊，葛诚，等．微生物降解农药的研究新进展［Ｊ］．微生物学通报，２００３，３０（６）：９３—９６．　［１８］王永杰，李顺鹏．原生质体转化构建有机磷农药降解工程菌［Ｊ］．应用与环境生物学报，１９９９，５：１６２—１６５．